【產品名稱】
單增李斯特顯色培養基
【產品用途】
單增李斯特顯色培養基用于分離和初步鑒別單增李斯特菌。
【檢驗原理】
蛋白胨、酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;色素與單增李斯特氏菌具有的酶發生特異性反應，水解底物，釋放出顯色基團，在平板上，單增李斯特氏菌呈現綠~藍綠色的光滑規則的小菌落;抑制劑和配套試劑可抑制雜菌的生長。
【單增李斯特顯色培養基配方成分】
配方(每升) | 含量 |
蛋白胨 | 15.0g |
酵母膏粉 | 5.0g |
瓊脂 | 15.0g |
氯化鈉 | 5.0g |
色素 | 2.3g |
抑制劑 | 5.0g |
去離子水(平板) | 1000ml |
終pH 7.1±0.2(25℃)
【使用方法】
1.稱取單增李斯特顯色培養基干粉47.3g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至*溶解，分裝三角瓶，充分溶解，121℃高壓滅菌15min，冷至50℃左右。
2.取10支配套試劑分別加入1mL無菌水，使之*溶解。
3.將配套試劑加入到已冷至48℃左右基礎培養基中，充分混勻后傾注無菌平皿。
4.按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液，進行增菌培養后，用接種環取1環增菌液，劃線接種于顯色平板上，置于36±1℃培養24-48小時。
5.觀察結果。致病性李斯特24h后開始出現藍綠色，至36～48h藍綠色明顯。挑取顯色平板上呈藍綠色光滑規則，直徑約1～2mm的可疑單菌落進行進一步的試驗。
6.對疑似單增李斯特氏菌菌落可使用HK-MID Listeria或API20E或生化管進行下一步的鑒定。
注：如產品類型為干粉，按上述1-6進行操作;若為即用型平板，按4-6進行操作即可。
【質量控制】
1.外觀方面
干粉基礎：流動性良好的淡黃色粉末。配套試劑：淡黃色凍干粉。
制備好平板：淡黃色不透明凝膠。
2.生物學方面
下列菌株接種單增李斯特氏菌顯色培養基后于36±1℃培養24-48h生長情況如下表：
【儲存條件及保質期】
干粉培養基：2～8℃避光保存，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期兩年。
配套試劑：2～8℃避光保存。貯存期兩年。
即用型平板：2～8℃避光保存，多一周。
【注意事項】
1、稱量時注意粉塵，佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統不適。
2、干粉培養基使用后立即旋緊瓶蓋，避免吸潮結塊。
3、自制平板時需注意培養基的厚度，厚度過薄容易造成瓊脂水分保持性下降，開裂;因此，一般需要15-20mL(Φ90mm)體積培養基，平板培養基厚度至少為2mm。
4、即用型成品平板應該盡量保持在2-8℃下保存且與存放容器冷凝管保持一定距離以避免凍損壞。產品多次在低溫與常溫之間變更會引起瓊脂的泌水，屬于正常現象。使用前應平衡至室溫且盡量在無菌干燥箱中預干燥。
5、質檢報告可以登錄環凱網站，打開“客服中心”頁面，輸入產品批號下載。
【廢物處理】
檢測之后帶菌平板置于121℃下高壓滅菌30分鐘后處理。
【執行標準】
Q/HKSJ 03 普通微生物培養基
